Мазок из глаза на инфекции: как берут, виды, результаты

Мазок из глаза на инфекции: как берут, виды, результаты

Мазок на инфекции из глаза

Чтобы точно определить возбудитель гнойно-воспалительного заболевания зрительной системы, получают мазок с конъюнктивы глаза, затем делают посев. С помощью этого анализа можно подтвердить или исключить несколько десятков болезней, например, конъюнктивит, ячмень, блефарит. Забор материала производится в условиях поликлиники, при соблюдении ряда правил. Полученные результаты позволяют правильно назначить лечение.

Особенности отбора и исследования мазка из глаза

Вирусные инфекции, поразившие носоглотку, часто бывают причиной гнойных заражений глаз. Нейтральные коринебактерии при определенных условиях также могут вызывать воспаления. Грибки рода Аспергиллус и Кандида появляются после лечения антибиотиками. Частая причина недугов — гонококки. Посев на микрофлору назначают, когда нужно выявить возбудитель, а также определить, какие лекарственные препараты противопоказаны при терапии. Образцы отделяемого берут при необходимости установить патогенные бактерии или вирусы, подтвердить или исключить следующие болезни:

  • блефарит;
  • конъюктивит;
  • кератит;
  • дакриоаденит;
  • дакриоцистит;
  • демодекоз;
  • иридоциклит;
  • контагиозный моллюск;
  • ретинит;
  • склерит;
  • эндофтальмит;
  • эписклерит;
  • ячмень.

Вернуться к оглавлению

Как берут мазок?

Если больной проходил лечение медикаментами, то их прием отменяют за 8—12 часов до проведения процедуры. Отделяемое на флору собирают сразу после пробуждения, до водных процедур, придерживаясь строгой методики:

  • Микрофлору собирают с помощью стерильной ватной палочки в каждом глазу по очереди.
  • Мазок при конъюнктивите делают при оттянутом веке, чтобы не касаться ресниц.
  • Сухие блефаритные корочки удаляют пинцетом и берут материал из открывшихся эрозий.
  • При кератите место манипуляции предварительно обезболивают.
  • Материал также берется с контактных линз, если пациент их носит.
  • Тампоны, отдельно для каждого глаза, вмещают в контейнеры, обозначают и немедленно отправляют на исследование. Если есть необходимость, то пробирки хранят при температуре не выше +8 °С.

Несоблюдение санитарных правил при использовании контактных линз часто приводит к гнойно-воспалительным заболеваниям глаз.

Виды анализов

Чтобы точно установить, какой микробиологический возбудитель является причиной болезни, мазок на бак посев исследуется несколькими способами:

Интенсивность роста патогенного агента может быть определена с помощью посева материала, взятого у больного, на питательную среду.

  • Цитологический анализ. Материал окрашивается и изучается под микроскопом.
  • Бактериоскопический. Проводится по тому же принципу, что и первый.
  • Бактериологический. Посев материала на питательную среду, чтобы определить интенсивность роста возбудителя.

Вернуться к оглавлению

Результаты исследования

В здоровом глазу некоторые бактерии можно обнаружить только на конъюнктиве в незначительном количестве. Если же бак посев показывает рост от 21 до 100 колоний и более, следует говорить о патологии. При анализе можно обнаружить стафилококки, гонококки, аденовирус, энтеровирус, хламидии, кандиды и много других патогенных организмов. Анализ показывает также индивидуальную непереносимость некоторых антибиотиков, если она есть. По результатам исследования врач назначает лечение, которое в 99% имеет положительный прогноз.

Мазок из глаза на инфекции: как берут, виды, результаты

При заборе клинического материала от больного и при последующей работе с ним необходимо помнить о потенциальной опасности любых биологических материалов, полученных от инфекционных больных. Использование защитной спецодежды, как минимум, перчаток и халата, а в случае возможности возникновения аэрозолей — защитных очков или масок, является обязательным. Направляемый на исследование заразный материал должен быть соответствующим образом упакован для предотвращения заражения окружающих и контаминации самого материала посторонними биологическими агентами. На каждую пробу, направляемую в лабораторию, заполняется соответствующее направление.

При определении перечня необходимых лабораторных исследований учитывают необходимость этиологической расшифровки диагноза и установления ведущих патогенетических звеньев данного заболевания, а также предполагаемый дифференциальный диагноз.

Забор клинического материала следует производить до назначения антимикробных (антибактериальных или противовирусных) препаратов. Основное внимание необходимо обратить на получение материала из основного очага локализации предполагаемого возбудителя. Кратность проведения исследования зависит от метода исследования, сроков забора материала, особенностей заболевания и т. д. Количество клинического материала определяется выбором методов исследования и разумной достаточностью, поскольку недостаточное количество материала может определять ложноотрицательный результат.

При взятии материала приготавливают мазки для первичной бактериоскопии и производят высевы на сывороточный и тиогликолевый бульоны (2 пробирки). Мазки высушивают, стекло маркируют. Нативный материал (тампон с материалом в пробирке) и посевы доставляют в лабораторию для дальнейшего бактериологического исследования.

Методы исследования глазных мазков

Проведение традиционных бактериологических исследований при инфекционных поражениях глаз не отличается от аналогичных исследований при бактериальных инфекциях другой локализации.
Для диагностики вирусных инфекций наряду с традиционными иммунологическими исследованиями с целью обнаружения специфических антител чаще всего используют метод флюоресцирующих антител. Материалом для исследования являются соскобы конъюнктивы или эпителия роговицы.

Вирусный антиген обнаруживается в соскобах эпителия конъюнктивы и роговицы больного глаза при поверхностных и глубоких кератитах, при иридоциклитах. Специфическое свечение в ряде случаев может выявляться даже у реконвалесцентов, перенесших вирусную инфекцию с поражением глаз.

В повседневной практике применяют как прямой, так и непрямой метод флюоресцирующих антител. Непрямой метод не уступает прямому в частоте выявления вирусного антигена, однако при нем фоновое свечение и неспецифическая флюоресценция выражены сильнее, что затрудняет оценку результатов. Использование специфических антител позволяет проводить серотипирование возбудителя без выделения самого вируса.

Еще одним методом диагностики вирусных поражений органа зрения является традиционная реакция непрямой гемагглю-тинации. В качестве метода экспресс-диагностики она может быть использована, например, для диагностики герпетических поражений глаза, особенно на поздних этапах заболевания. Для анализа получают небольшое количество слезной жидкости, в которой определяют наличие антигена вируса герпеса. Для РНГА используют герпетический гамма-глобулиновый эритроцитарный диагностикум.

Читать еще:  Гонорейный конъюнктивит: причины, симптомы, методы диагностики, способы лечения, возможные осложнения и прогноз врачей, рекомендации по профилактике

Метод выделения вируса может быть использован только при наличии специальной вирусологической лаборатории. Он дорогостоящ, занимает достаточно длительное время и требует высокой квалификации специалистов. В качестве исходного материала могут использоваться смывы с конъюнктивы, соскобы с конъюнктивы и роговицы, мазки-отпечатки и т. д.

Цитологический метод исследования глазных мазков. Исследование фиксированных и окрашенных соскобов конъюнктивы и роговицы может служить вспомогательным методом в диагностике вирусных поражений глаз. Одновременно отмечается усиление амитотического деления эпителиальных клеток и появление многоядерных клеток. При этом регулярно отмечаются базофилия их цитоплазмы, наличие внеклеточного детрита. Внутриядерные включения были описаны в роговичных соскобах кроликов, зараженных вирусом простого герпеса.

Определенные трудности связаны с диагностикой паразитарных заболеваний глаза. Так, при онхоцеркозе используют обнаружение микрофилярий в срезах кожи, в тканях и средах глаза, в моче и крови. Выявление паразитов в глазу позволяет установить диагноз и оценить тяжесть поражения органа зрения и при других паразитарных заболеваниях. Для диагностики ряда паразитарных инвазий применяют внутрикожные пробы (лоаоз и др.).

Серологические методы исследования глазных мазков позволяют выявить в сыворотке крови специфические антитела. Определенное диагностическое и прогностическое значение имеет изучение иммуноглобулинов в слезной жидкости.
В большинстве случаев диагностика инфекционных поражений органа зрения проводится в соответствии с рекомендациями, приведенными в указаниях и рекомендациях по диагностике той или иной конкретной инфекции с обязательными дополнительными исследованиями биологических материалов, полученных при проведении осмотра пораженного глаза.

Цитологическое исследование в офтальмологии и диагностика бактериального конъюнктивита

Конъюнктивит – крайне неприятное заболевание, поражающее наружную оболочку глаз. Болезнь может возникнуть из-за недостаточной гигиены рук или при наличии предрасположенности, нередко формируется хроническое течение.

Бактериальный конъюнктивит имеет самое тяжелое течение, но для его диагностики необходимо специальное цитологическое исследование. Для постановки диагноза врачам нужно определить тип бактериального возбудителя и потом назначить правильное лечение.

Что такое бактериальный конъюнктивит?

Конъюнктивит – это воспалительное заболевание, поражающее самую наружную оболочку глаза. Болезнь возникает по многим причинам, включая бактериальную, вирусную или грибковую инфекцию.

Инфекционный агент чаще всего заносится в область конъюнктивы вследствие недостаточной гигиены органа зрения. Это распространенное заболевание глаз.

Исследования подтверждают, что только 35% пациентов, обращающихся к врачу с инфекционным конъюнктивитом, имеют бактериальную инфекцию. Бактериальная этиология часто зависит от возраста и места проживания пациента, но обычно болезнь вызывают такие виды, как стафилококк, стрептококк, коринобактерия и псевдомонада.

Бактериальный конъюнктивит, возникающий из-за грамположительных бактерий, обычно имеет более мягкое течение, чем конъюнктивит, вызванный грамотрицательными бактериями. Такая форма заболевания условно считается доброкачественной и локализированной, ее легко лечить антибиотиками.

Грамотрицательные бактерии, вроде псевдомонад, хламидий и нейссерий, вызывают тяжелую инфекцию с возможным распространением в соседние ткани. Эта форма болезни может перерасти в тяжелую системную инфекцию.

Осложнения бактериального конъюнктивита могут варьироваться от легкого раздражения роговицы до тяжелого нарушения зрения.

Хламидия и нейссерия вызывают самые тяжелые осложнения у пациентов.

Симптомы и диагностика бактериального конъюнктивита

Симптомы бактериального конъюнктивита, помимо отека и воспаления, включают следующие проявления:

  • Возникновение папиллообразных структур на поверхности конъюнктивы. Это может быть признаком вирусного течения заболевания или гиперчувствительности в ответ на бактериальную инвазию.
  • Появление гноя белого, зеленого или желтого цвета по краям век. Многие пациенты жалуются на то, что утром не могут открыть глаза из-за высыхания гноя.
  • Увеличенный преаурикулярный лимфатический узел. Признак чаще встречается при вирусном течении, хотя нередко возникает и при инвазии грамотрицательных бактерий.
  • Отек глаз. При бактериальном конъюнктивите, как правило, выражен незначительно.

Для точной диагностики бактериального конъюнктивита пациентам назначают мазок конъюнктивы. Собранный материал отправляется в лабораторию для цитологического исследования и выделения бактериальной культуры.

Для забора мазка рекомендуется использование аппликаторов с искусственными волокнами, так как хлопковые аппликаторы обладают бактериостатическими свойствами.

Мазок и дальнейшее цитологическое исследования важны для назначения адекватного лечения, так как необходимо назначение антибиотиков. К сожалению, многие врачи назначают антибиотики, не опираясь на результаты цитологии.

О симптомах аденовирусного коньюктивиа расскажет видеосюжет:

Цитологическое исследование как главный диагностический метод

Многие пациенты интересуются, что такое цитологическое исследование в офтальмологии. В сущности, это обычное лабораторное исследование клеток и одноклеточных организмов, оказавшихся в мазке.

Мазок конъюнктивы может быть взят с использованием местного анестетика и платинового шпателя (или аналогичного металлического инструмента). Это процедура обязательно должна быть выполнена перед назначением антибиотиков.

Окрашивание материала мазка по Граму полезно для выявления бактериальных характеристик. В то же время окрашивание по методу Романовского-Гимзе помогает обнаружить внутриклеточные включения, вроде хламидий. Анестетик не должен содержать консерванты, иначе возможен ложноотрицательный результат бактериального посева.

Бактериальная культура может быть выведена для обнаружения хламидий и других инфекционных агентов. Обнаружение грибковой культуры крайне нехарактерно для конъюнктивита, но такое случается при язве роговицы.

Характер воспалительной реакции отражается на клеточном ответе. Лимфоциты преобладают в случае вирусной инфекции, а нейтрофилы наиболее активны при бактериальных инфекциях. Эти детали также выявляются при цитологическом исследовании материала мазка.

Читать еще:  Контактные линзы дезио: описание фирмы и виды

Как избежать возникновения заболевания?

Профилактические меры важны не только для предотвращения развития бактериального конъюнктивита, но и для облегчения симптомов уже возникшей инфекции. Перечислим несколько рекомендаций.

Необходимо на время отказаться от ношения контактных линз. Линзы можно будет снова использовать после исчезновения всех симптомов заболевания. Также не следует повторно надевать старые линзы, которые были использованы перед возникновением инфекции, так как возможно возникновение повторной инфекции.

Следует использовать специальные глазные капли для увлажнения глаза. Капли облегчают течение конъюнктивита, сопровождающееся избыточной сухостью глаз. Нужно аккуратно очищать веки и ресницы от липких выделений. Используйте вату, смоченную в воде. Требуется регулярное мытье рук.

Профилактика конъюнктивита поможет ускорить выздоровление и избежать формирования хронического течения болезни.

Лечение бактериального конъюнктивита

Антибиотики не всегда назначают при инфекционном конъюнктивите, так как чаще всего заболевание прекращается без медицинского вмешательства. Кроме того, осложнения возникают довольно редко. Как правило, антибиотики назначаются при тяжелом течении болезни, прогрессирующей на протяжении двух и более недель.

Как уже было сказано, перед назначением антибиотиков обязательно должно быть проведено цитологическое исследование для определения возбудителя. Разные бактериальные штаммы требуют назначения разных противомикробных препаратов, это ключевой момент терапии.

Врачи назначают антибиотики наружного применения, вроде хлорамфеникола или фузидиновой кислоты. До проведения цитологии возможно назначение антибиотиков широкого спектра действия.

Таким образом, мазок и цитологическое исследование конъюнктивы являются основными методами диагностики бактериального конъюнктивита. Это крайне важные манипуляции, необходимые для назначения адекватного лечения.

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

4.1.2 Методы лабораторной диагностики

В настоящее время для определения этиологии конъюнктивитов и кератитов применяют следующие методы лабораторной диагностики:

  • непосредственное определение возбудителя в соскобе (цитологический метод с окраской по Романовскому и по Граму, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный, полимеразная цепная реакция — ПЦР);
  • выделение хламидий и микоплазм в культуре клеток — культуральный метод, который считается эталонным;
  • серологические тесты.

Результаты лабораторной диагностики зависят от тщательности выполнения процедуры забора патологических клеток конъюнктивы или роговицы. Применяют соскобы с конъюнктивы и мазки-отпечатки с конъюнктивы и роговицы.

Для забора соскобов необходимы следующие манипуляции: после эпибульбарной однократной анестезии с конъюнктивы верхнего и нижнего века с помощью одноразовых зондов-пробоотборников забирают клетки с патологически измененной конъюнктивы. Материал наносят на обычные предметные стекла, сушат в течение 8-10 мин на воздухе и фиксируют ацетоном, после чего предметные стекла с фиксированным материалом рекомендуется в течение 1 ч транспортировать в микробиологическую лабораторию.

Мазки-отпечатки берут с конъюнктивы нижнего века или роговицы, что позволяет повысить достоверность лабораторной диагностики. С помощью пинцета покровную пластинку прижимают к конъюнктиве век, глазного яблока или непосредственно к роговице после эпибульбарной анестезии любым анестетиком. Затем мазок-отпечаток сушат на воздухе в течение 5 мин и фиксируют метиловым спиртом. Транспортировку материала необходимо осуществлять в течение 1 ч после его забора.

Цитологический метод. Этот простой и доступный метод при острых или хронических конъюнктивитах дает много дополнительной информации для уточнения этиологии воспалительного процесса. При использовании специальных окрасок (по Граму и Романовскому) можно выявить хламидийные включения, разнообразную бактериальную флору, мицелий грибов, воспалительные клетки, измененные ядра и цитоплазму клеток конъюнктивы и роговицы. Диагностическая ценность данного метода зависит от внимательности исследователя.

Для бактериальных конъюнктивитов характерны обнаружение большого количества нейтрофилов, отсутствие изменений эпителиальных клеток. При вирусных конъюнктивитах обнаруживают дистрофические изменения эпителиальных клеток. В экссудате преобладают лимфоциты и макрофаги. При аллергических конъюнктивитах в экссудате преобладают эозинофилы и базофилы.

Прямая иммунофлюоресценция — достоверный и специфичный метод. Соскобы с конъюнктивы глаза окрашивают родоспецифическими моноклональными антителами хламидий, вируса простого герпеса типа 1 и 2, аденовируса. Данные антитела представляют собой моноклональные мышиные антитела, специфичные к определенному антигену. При люминесцентной микроскопии хламидий и вирусы выявляются либо в пораженных клетках в виде характерных цито-плазматических включений, окрашенных в зеленый цвет, либо внеклеточно в виде отдельных образований, окрашенных в ярко-зеленый цвет.

Культуральный метод является дорогостоящим и трудоемким. К отрицательным сторонам этого метода следует отнести длительность культивирования (48—52 ч). Однако возможность получения четких результатов даже при минимальном присутствии микрофлоры является важным преимуществом культурального метода.

Для идентификации и дифференциального титрования микоплазм используют специальный набор. Данная методика позволяет культивировать, а также идентифицировать микоплазмы. Идентификация и титрование микоплазм основаны на специфических свойствах мик-роорганизма, который гидролизует мочевину (Ureaplasma urealiticum) или аргинин (Ureaplasma hominis). При этом образуется ион аммония и происходит защелачивание среды. Вследствие этого изменяется цвет индикатора кислотности среды, что позволяет визуализировать реакцию. Титр микоплазм выражается в количестве единиц изменения цвета (ЕИЦ) на 1 мл пробы. Культивирование позволяет определить титры порядка 103/мл, которые уже считаются патогенными.

ПЦР позволяет непосредственно определить специфический участок последовательности ДНК для любого известного микроорганизма и вируса.

Серологические методы имеют второстепенное значение. Используют различные иммунные реакции, оценивается диагностический титр (1/64). Но даже при достоверно положительном титре для определенной инфекции в сыворотке крови невозможно установить локализацию патологического процесса и достоверно определить стадию заболевания.

В стадии разработки находится метод определения иммуноглобулинов различных классов в слезной жидкости. Обсуждается вопрос диагностической ценности этого метода и его помощи в постановке диагноза хламидийного поражения органа зрения. Чаще всего иммуноферментным методом определяют секреторные иммуноглобулины класса А и G. Считается, что появление в слезной жидкости иммуноглобулинов различных классов связано с несколькими причинами. Во-первых, это транссудация их из крови, во-вторых, активизация локального иммунитета непосредственно в органе зрения.

Читать еще:  Народные средства от ячменя: алоэ, хозяйственное мыло, чай

Проводят забор слезной жидкости с последующим проведением серологического анализа.

Методика забора слезной жидкости

Для забора слезной жидкости может быть использован пипеточный дозатор. Слезную жидкость собирают в стерильные пробирки Эпиндорфа. С помощью пластиковой насадки, которая имеет округлый край и закрепляется на пипеточном дозаторе, из нижнего конъюнктивального мешка собирают слезную жидкость. Предварительную эпибульбарную анестезию конъюнктивы и глазного яблока не проводят. Не рекомендуется использовать какие-либо химические вещества, стимулирующие слезоотделение. Пациентов просят смотреть кверху во время всей процедуры. Слезная жидкость собирается в течение 7—15 мин из нижнего конъюнктивального мешка обоих глаз, достаточно около 1 мл слезной жидкости. Биологический материал не позднее 2 ч после забора при комнатной температуре необходимо транспортировать в иммунологическую лабораторию.

Серологический анализ слезной жидкости включает определение чаще всего иммуноглобулинов класса А и G. Используют метод иммуноферментного анализа (ИФА), который обладает высокой специфичностью и чувствительностью. Чаще всего диагностический титр в таких тест-системах составляет 1/32. Соответственно результаты с титром менее 1/32 считаются отрицательными для определения антител к IgA и IgG.

О рекомендациях как подготовиться к сдаче ПЦР-теста на COVID-19

В условиях сохранения рисков распространения новой коронавирусной инфекции Роспотребнадзор напоминает, что при сдаче ПЦР-теста необходимо соблюдать определенные рекомендации.

Что будет, если есть или пить перед сдачей мазков для теста ПЦР?

По инструкции к наборам для ПЦР-исследования на SARS-CoV-2 взятие мазков рекомендуется проводить не раньше 3-4 часов после последнего приёма пищи. Почему это важно?

Коронавирус SARS-Cov-2 живет внутри эпителиальных клеток. Для ПЦР-исследования важно получить мазок с достаточным количеством инфицированных клеток. В момент проглатывания еды эпителиальные клетки механически слущиваются пищевым комком с поверхности слизистой оболочки. Если взять мазок сразу после еды, в пробирку может попасть недостаточное количество инфицированных клеток. В этом случае, пациент может получить ложноотрицательный результат анализа. То же самое касается питья. Вода смывает с поверхности миндалин, задней стенки глотки инфицированные клетки.

Можно ли пользоваться лекарственными средствами в нос и горло (капли, спреи, антисептики) перед сдачей мазков?

Перед взятием мазков ни в коем случае нельзя использовать лекарственные средства для местного применения (капли, спреи и др). После их применения количество вируса на слизистой снижается и увеличивается вероятность получения ложноотрицательных результатов ПЦР-теста.

Можно ли употреблять алкоголь перед сдачей теста ПЦР и как это повлияет на результат?

Алкоголь содержит этиловый спирт (этанол), который также входит в состав многих антисептических средств. По рекомендациям Роспотребнадзора, для эффективного антисептического действия в составе дезинфицирующего средства должно быть не менее 60-80% этилового спирта. Хотя в состав спиртных напитков (обычно) входит меньше этанола, чем необходимо для дезинфекции, но после приема алкоголя вероятность выявления коронавируса в мазке также может снизиться.

Почему нельзя чистить зубы перед сдачей теста ПЦР?

Основная цель на этапе взятия мазков для ПЦР-исследования – получить биологический материал с достаточным количеством клеток, пораженных коронавирусом. Применение любых очищающих средств для полости рта снижает количество вируса в получаемом мазке. Зубная паста может содержать антисептические компоненты. Попадание ее остатков в пробирку с мазком может мешать проведению анализа. Кроме того, чистка зубов требует еще и дополнительного полоскания рта, что также не рекомендовано перед забором биоматериала.

Применение косметики (помады, блески и бальзамы для губ) может повлиять на результат теста?

Материал для исследования берут не из полости рта, а из зева и носоглотки. Если соблюдать все правила взятия мазка и не прикасаться зондом к губам, то наличие декоративной косметики не должно помешать получению адекватного материала для ПЦР-теста. Но при случайном попадании в пробу косметические средства могут замедлить ПЦР-реакцию. Поэтому лучше декоративную косметику нанести уже после того, как мазок был взят.

Откуда все-таки берут мазок – из зева или носоглотки?

И из зева, и из носоглотки. Входными воротами для вируса SARS-CoV-2 являются верхние дыхательные пути. После попадания на слизистые носо- и ротоглотки (зева) вирус начинает размножаться в эпителиальных клетках.

Поэтому в конце инкубационного периода и в первые дни клинических проявлений наиболее информативными являются мазки именно из этих областей. Для исследования мазок берут с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки. При взятии мазка из носоглотки зонд вводят по наружной стенке носового хода на достаточную глубину. Мазок, взятый со слизистой преддверия носа, может не выявить РНК коронавируса SARS-CoV-2.

Минимум за 3 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) нельзя: принимать пищу, пить, чистить зубы, полоскать рот/горло, использовать спрей-освежитель для ротовой полости, жевать жевательную резинку, курить.

Минимум за 3 часа до взятия мазков из носоглотки нельзя: промывать нос, использовать спреи, капли, мази для носа.

За два дня до взятия мазка рекомендуется отказаться от употребления спиртных напитков.

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector